Imunohistokemijska analiza karcinoma dojke: dekodiranje i indikacije

Citokeratin 14;

ChromograninA;

EMA;

Melanoma

Melanom (latinski melanom, melanom malignum od starogrčkog μέλας - „crni“) (usta. Melanoblastoma) je maligni tumor koji se razvija iz melanocita - pigmentnih stanica koje proizvode melanine. Jedna od tri vrste raka kože, i najopasnija od njih. Uglavnom se lokalizira u koži, rjeđe u mrežnici, sluznici (usna šupljina, vagina, rektum). Jedan od najopasnijih zloćudnih tumora za čovjeka, često ponavljajući i metastatski limfogeni i hematogeni u gotovo svim organima. Provjera kožnog melanoma i njegovih metastaza ostaje jedan od najtežih zadataka onkomorfologa. Među ne-pigmentiranim melanomima postoje nodularni, površinski rašireni, poput lentigo-a, bistro-stanični, vretenasti, pleomorfni, malocelični, miksoidni, „nevoidni“, krikoidni i drugi oblici.

Glavni dijagnostički markeri:

• MelanomAsociraniAntigen (MAA)
  ;
• CD63
  ;
• Marker melanoma (HMB45)
  ;
• MART-1 / Melan-A
  ;
• Melanom (gp100)
  ;
• tirozinaze
  ;
• Faktor transkripcije mikroftalmije (MiTF)
  ;
• Receptor faktora rasta živaca (NGFR)
  ;
• S100
  ;
• Pan za melanom (HMB45 + A103 + T311)
  ;
• MART-1 + tirozinaza
  ;
• vimentin
  .

Standardni panel sadrži oko pet imunohistokemijskih markera:

• p53
  - stupanj aktivnosti mitoze melanoma;
• Ki-67
  - procjena intenziteta proliferacije, određuje prognozu bolesti;
• bcl-2
  - protein koji sprečava prirodnu apoptozu kožnog melanoma, procjenjuje se vjerojatnost metastaza;
• HMB-45
  - procjena funkcije melanocita;
• S-100
  - tipični antigen, koji se nalazi samo u melanomu, radi razlikovanja od ostalih tumora ili benignih formacija.

Limfoproliferativni poremećaji

Limfom je zloćudna tumorska bolest limfnog sustava. Među limfomima razlikuje se limfogranulomatoza (Hodgkinov limfom), a sve ostale vrste limfoma su ne-Hodgkinovi limfomi (NHL). Prema vrsti limfoidnih stanica iz kojih tumor nastaje, izolirani su B-, T- i (rijetko) NK-stanični limfomi. Većina limfoma čini B stanicu. Dijagnoza limfoproliferativnih bolesti trenutno je na prvom mjestu moderne patologije i zahtijeva jedan od najopsežnijih ploča s markerima. Ukupna učestalost svih vrsta ne-Hodgkinovih limfoma u europskim zemljama iznosi 12-15 slučajeva na 100 tisuća stanovnika godišnje. Rizik od njihove pojave povećava se s godinama. Infekcija virusom Epstein-Barra povezana je s povećanim rizikom od razvoja različitih vrsta limfoma, uključujući Burkittov limfom. U djece su ne-Hodgkinovi limfomi relativno rijetki: ne više od 5% svih slučajeva NHL-a pripisuju se djetinjstvu i adolescenciji. Međutim, limfomi i dalje zauzimaju treće mjesto u strukturi dječjih malignih bolesti po učestalosti - nakon leukemije i tumora središnjeg živčanog sustava..

Glavni dijagnostički markeri:

Stromalni tumori gastrointestinalnog trakta (SOGT)

Gastrointestinalni trakt javlja se uglavnom u želucu (60%) i tankom crijevu (25%), ali se javlja i u rektumu (5%), jednjaku (5%) i brojnim drugim mjestima (5%), uključujući dodatak, žučni mjehur, mezenterija i omentum. Starost pogođenih bolesnika kreće se od adolescencije do 90 godina, ali većina je starijih osoba s vrhuncem od oko 60 godina. U većini studija postoji mala predispozicija za muškarce. 1998. godine pokazano je da TGCT eksprimira receptor za tirozin kinazu KIT (CD117). Intersticijske stanice Cajala (ICC) bile su uzrok ovih tumora. Kao i GST, Cajal stanice izražavaju KIT i većina ih je pozitivna na CD34. Naknadne studije s velikim brojem različitih laboratorija potvrdile su da je KIT najspecifičniji marker SOS-a. U otprilike 90% slučajeva prisutan KIT prisutan je na staničnoj površini i / ili u citoplazmi tumorskih stanica u gastrointestinalnom traktu. U velikoj većini tumora, KIT ekspresija je snažna i homogena, ali u nekim se slučajevima pokazuje samo žarišna pozitivna reaktivnost, a KIT je odsutan u maloj podskupini (

5%) tumora, koji prema drugim morfološkim i imunofenotipskim karakteristikama odgovaraju gastrointestinalnom traktu. Među KIT-pozitivnim SALFA-om, ekspresija CD34 određena je u 60-70% slučajeva, dok je 30-40% pozitivno na aktin glatkog mišića (SMA), a 5% na protein S-100. Nijedan od ovih antigena nije specifičan za gastrointestinalni trakt. Ekspresija desmina u stvarnom KIT-pozitivnom SAT-u je izuzetno rijetka (1-2% slučajeva) i obično je žarišna. Ovaj je oblik onkoloških bolesti teško morfološki dijagnosticirati. Korištenjem modernih ploča s markerima moguće je jasno i razumno dijagnosticirati različite oblike opisane patologije. Imunohistokemija je obavezna.

Glavni dijagnostički markeri:

Rak debelog crijeva

Kolorektalni karcinom je treći najčešće dijagnosticirani rak u Sjedinjenim Državama (bez raka kože) u muškoj i ženskoj populaciji. Stopa incidencije kolorektalnog karcinoma opadala je u posljednja dva desetljeća (od 66,3 slučaja na 100 000 u 1985. na 45,5 slučajeva u 2006.). To se pripisuje povećanoj upotrebi testova za kolorektalni probir koji omogućuju otkrivanje i uklanjanje gastrointestinalnih polipa prije nego što postanu rak. Za razliku od ukupnog pada, među mlađom odraslom populacijom mlađom od 50 godina, za koju se ne preporučuje probir zbog umjerenog rizika, učestalost karcinoma debelog crijeva i rektuma povećava se od 1994. za oko 2% godišnje kod muškaraca i žena. Godine 2020. stopa smrtnosti od kolorektalnog karcinoma u SAD iznosila je 49.500. Smrtnost od kolorektalnog karcinoma opadala je u obje skupine muškaraca i žena u posljednjih nekoliko desetljeća, a strmiji pad u posljednje vrijeme. Taj pad odražava pad stope obolijevanja i poboljšanje rane dijagnoze i liječenja. Rane faze karcinoma debelog crijeva i rektuma obično su asimptomatske, pa je probir često potreban za otkrivanje bolesti u ovoj ranoj fazi. Napredovanje bolesti može uzrokovati krvarenje iz rektuma, pojavu krvi u stolici, promjenu pokreta crijeva, grčeve u donjem dijelu trbuha. Upotreba IHC-a kod raka debelog crijeva razmatra se na nekoliko razina: za karakterizaciju tumora (endokrini ili epitelijski tip), nasljednu predispoziciju i u svrhu prognoze. Pretežna upotreba IHC-a je identificiranje mogućih ili sumnjivih metastaza u kojima je debelo crijevo mogući osnovni. Tipična mjesta metastaza u debelom crijevu su jetra i pluća, oba organa koja mogu proizvesti morfologiju raka identičnu metastazi u debelom crijevu. IHC (klasa I FDA regulacije) koristi se nakon početne dijagnoze tumora histopatološkim pregledom i nije uključen za kliničare kao neovisno istraživanje.

Glavni dijagnostički markeri:

Metastatski karcinom

Najčešća upotreba imunohistokemije u istraživanju tumora jetre je određivanje izvora metastaza kada primarna lokalizacija tumora nije poznata. Razvoj i primjena imunološkog panela može pomoći u rješavanju gotovo svih dijagnostičkih problema. 2-6 Citokeratini (CK) 7 i CK 20 - prvi korak u identifikaciji mnogih tumora i dodatnim imunološkim odgovorima relativno specifičnim za tumore ženskog i muškog genitalnog trakta, često omogućuju prepoznavanje primarne lokalizacije metastatskog tumora.

Glavni dijagnostički markeri:

• Citokeratini različitih molekularnih težina (CK 18, CK 19, CK 7 i CK 20, itd.).

Također se preporučuje uključivanje IHC testova usmjerenih na ekspresiju HER2 / neu i Ki-67 u dijagnostičkoj ploči..

• HER2 / neu
  - je membranski protein koji je kodiran ERBB2 genom. Povećanje njegove ekspresije važno je u patogenezi i napredovanju određenih malignih procesa. Ispitivanje ovog receptora važan je biološki pokazatelj raka želuca, dojke, maternice i njegovih dodataka.;
• Ki-67
  - nuklearni antigen, koji se sastoji od dva polipeptidna lanca i koji je glavni dio nuklearne matrice. Njegova ekspresija omogućava izoliranje proliferacijskih tumorskih stanica koje su u aktivnoj fazi životnog ciklusa stanice. Ovaj marker omogućuje određivanje fenotipa i brzine rasta tumora, rizik od metastaza, potencijalni odgovor na liječenje i ishod patološkog procesa..

Tumori želuca.

Imunohistokemijska ispitivanja (IHC) općenito nisu potrebna za procjenu benignih i malignih tumora želučanog epitela, jer histopatologija obično daje dijagnozu, ali IHC je potreban u istraživanju metastatskog karcinoma želuca kada izvor tumora nije jasan, ili kada makroskopski / Rendgenske manifestacije tumora su zbunjujuće (na primjer, rak želuca izravno i široko napada invaziju jetre i histološki se ne razlikuje od kolangiokarcinoma). Pored toga, IHC može biti koristan za identifikaciju nekoliko varijanti karcinoma želuca, uključujući hepatoidni adenokarcinom kod kojih se jetrena diferencijacija može potvrditi pozitivnim AFP odgovorom. Gastrični adenokarcinomi reagirat će s mnogim anti-keratinskim protutijelima, uključujući CK 18, CK 19, CK 7 i CK 20. Kada se CK 7 i CK 20 upotrebljavaju zajedno, mnogi želučani adenokarcinomi će obojati i CK 7 i CK 20. Otprilike 25% slučajeva će imati fenotip CK 7 + / CK 20- ili CK 7- / CK 20+), a mali broj slučajeva bit će negativan za oba markera. U početku se mislilo da će CDX-2, specifičan marker raka debelog crijeva, biti reaktivan u više od 50% slučajeva i može ukazivati ​​na manje invazivnosti. Adenokarcinom želuca, karcinom crijeva i karcinom signifikantnih stanica, može imati neuroendokrino diferencijaciju i što možda nije očito iz histološke slike, ali se očituje obojenjem kromograninom i / ili sinaptofizinom

Određivanje ekspresije EGFR receptora u epitelnim tumorima

Određivanje imunohistokemijske (IHC) ekspresije receptora EGFR kod kolorektalnog karcinoma i tumora pluća, kao i kod tumora vrata i glave, provodi se za adekvatan izbor režima liječenja kemoterapijom.

EGFR (receptor epidermalnog faktora rasta) jedan je od transmembranskih receptora, izražava se na površini epitelnih stanica i sudjeluje u regulaciji rasta i diferencijacije stanica. Podjela stanica u njenoj prisutnosti događa se mnogo brže. Kada se EGFR receptor aktivira nakon vezanja na faktore rasta (EGF i TGF-a), aktiviraju se mehanizmi koji dovode do rasta tumora i povećava se proliferacija stanica karcinoma, a potiče se i proces metastaziranja. Ekspresija EGFR je pokazatelj da se stimulira rast tumora aktivnost receptora za epidermalni faktor rasta. Kako se aktiviranje receptora događa zbog samih tvari neoplazme, bilo bi ispravnije govoriti o ekspresiji EGFR-a tumorom. Ekspresija EGFR-a nalazi se u slijedećim oblicima raka: pluća, vrata i glave, debelog crijeva i rektuma. Imunohistokemijsko određivanje ekspresije EGFR-a omogućava uspostavljanje statusa tih receptora i propisivanje liječenja. Ekspresija EGFR-a izravno je povezana sa stupnjem zloćudnosti i stadijom razvoja tumora. Specijalist, prema dobivenim podacima imunohistokemijske studije, klasificira tumor kao EGFR-negativan ili EGFR-pozitivan.

Prekomjerna ekspresija EGFR-a ukazuje na visoku malignost, kasni razvoj tumora i metastatske procese. Ovaj faktor je nepovoljan u odnosu na prognozu bolesti i ukazuje na visoku proliferativnu aktivnost tumora, agresivnost, otpornost na terapiju..

Nizak stupanj ekspresije EGFR-a ukazuje na regresiju tumora s pozitivnom dinamikom u liječenju.

Imunohistokemijsko istraživanje osjetljivosti receptora na estrogen i progesteron u endometriju

Provodi se imunohistokemijsko istraživanje osjetljivosti receptora na estrogen i progesteron u endometriju kako bi se utvrdili uzroci nedostatka plodnosti, kao i radi procjene zloćudnosti procesa u tkivima maternice. Studija je složena, provodi se planirano, potrebna je odgovarajuća kvalifikacija patologa.

Receptori za estrogen (ER) i progesteron (PR)

- to su osjetljivi markeri koji reagiraju na fluktuacije određenih hormona koji utječu na rast tumora i razvoj hiperplastičnih procesa u endometriju. Smješteni su kako u tkivima epitela maternice, tako i u stanicama mliječne žlijezde. Njihovo određivanje omogućava procjenu utjecaja hormonalnih čimbenika na progresiju malignog rasta, a osim toga identificiranje prisutnosti drugih žarišta aktivnosti, osim maternice. Uključeni su u program obveznog probira za bolesne žene s sumnjom na infiltrativno djelovanje karcinoma.

Imunohistokemijska studija se provodi sa:

• neplodnost;
• endometrijski tumori;
• disfunkcija menstruacije;
• hiperplastični procesi u endometriju.

U slučaju neplodnosti, tehnika će vam omogućiti da otkrijete može li se oplođena jajašca pričvrstiti na zid maternice. Za rak, metoda nije rana dijagnoza. Procjena aktivnosti receptora omogućava prepoznavanje prisutnosti metastaza i procjenu učinkovitosti liječenja u šupljini maternice. U slučaju poremećaja ovulacije, tehnika otkriva učinkovitost hormonske terapije. S promjenama u materničnoj šupljini hiperplastične prirode, povećanje aktivnosti receptora za estrogen i progesteron ukazuje na razvoj slabo diferenciranih tumora, potencijalno opasnih za ženin život.

Opće načelo rezultata

- što je veća ekspresija aktivnosti receptora, veća je vjerojatnost napredovanja tumora. Što je niža aktivnost, to je manja mogućnost prirodne gnojidbe.

Kronični endometritis

Kronični endometritis je upala sluznice sloja maternice, koju izazivaju razni virusi ili patogeni mikroorganizmi. U patološkom fokusu dolazi do morfoloških i funkcionalnih promjena endometrija.Hronični endometritis je klinički i morfološki sindrom u kojem se, kao posljedica oštećenja endometrija infektivnim agensom, događaju višestruke sekundarne morfofunkcijske promjene, što narušava cikličku biotransformaciju sluznice maternice, što dovodi do trajnog poremećaja menstrualne i generativne funkcije. učestalost kroničnog endometritisa u populaciji je 2,6-51%. Štoviše, 60,4% tih žena su neplodne, a neuspješni pokušaji IVF-a i prijenos embrija zabilježeni su u 37%. 2006. godine Međunarodna federacija ginekologije i akušerstva izjednačila je koncepte "nerazvijene trudnoće" i "kroničnog endometritisa".

Uzroci kroničnog endometritisa:

• infekcije zdjeličnih organa, vagine i cervikalnog kanala;
• intrauterini uređaj;
• rani intimni kontakti;
• radioterapija zdjeličnih organa;
• kirurška intervencija u šupljini maternice;
• zlouporaba alkohola i pušenje.

Stručnjaci koji se bave praksom odnose upalne procese koji se događaju u zdjeličnim organima kao autoimunu patologiju. Da bi se utvrdila priroda poremećaja i identificirali pacijenti s patološkim odgovorom imunološkog sustava koji izaziva upalu endometrija, propisano je imunohistokemijsko istraživanje koje se provodi pomoću standardne ploče monoklonskih protutijela: CD16, CD20, CD138, CD56, HLA-DR.

Imunohistokemijska studija osjetljivosti endometrija (implantacijski prozor)

Receptivnost endometrija je kompleks strukturnih i funkcionalnih karakteristika endometrija, što određuje njegovu sposobnost implantacije. Od početka 90-ih godina prošlog stoljeća, pojam "prijemčivosti endometrija" počinje dobivati ​​svoje suvremeno značenje kao proces složene integracije i višerazinskog "dijaloga" između endometrija i zametaka u određenom razdoblju "implantacijskog prozora". Trajanje "implantacijskog prozora" u ljudi je u prosjeku 4 dana: od 6. do 8. do 10. dana nakon vrhunca izlučivanja LH, odnosno 20-24 dana menstrualnog ciklusa (s menstrualnim ciklusom od 28 dana). Trenutno postoje tri stupnja receptivnosti: genetska, proteomska i histološka. Kada se otvori „implantacijski prozor“, ekspresija 395 gena (ApoE, PLA2) se povećava u endometriju i ekspresija 186 gena (ITF, različite proteaze, proteini izvanstanične matrice itd.) Smanjuje se. Među proteomskim markerima povezanima s prijemčivima endometrija razlikuju se različite molekule adhezije, faktori rasta, citokini i receptori: IL-1 porodica, LIF i LIF-R, αVβ3, TNF-α, IFN-γ, itd. Od njih je leukemija najviše proučavana -inhibicijski faktor (LIF) član je IL-6 obitelji. Njegova najveća ekspresija u endometriju opažena je 20. dana ciklusa, treća razina receptivnosti je histološka. "Prozor implantacije" u endometriju odgovara srednjem stadijumu sekrecijske faze menstrualnog ciklusa. Endometrij može imati receptivna svojstva samo ako se molekularni biljezi receptivnosti otkriju točno u srednjem stadijumu faze izlučivanja menstrualnog ciklusa. Jedna od ključnih ultrastrukturnih formacija koja sudjeluje u stvaranju receptivnosti jesu. pinopodia. To su mikroskopske izbočine u apikalnom dijelu površinskog epitela endometrija, formirane na mjestu mikrovillija u "prozoru za implantaciju" i izbočene u šupljinu maternice. Pretpostavlja se da su glavni receptori za vezanje blastocita smješteni na površini pinopodija, gdje je koncentriran i LIF. Svaka neravnoteža u ekspresiji steroidnih receptora može dovesti do poremećaja morfofunkcijskih svojstava endometrija, njegove receptivnosti. Stoga određivanje razine ER i PR u srednjem stadijumu faze sekrecije omogućuje dopunu morfološkog pregleda endometrija, radi procjene njegove receptivnosti. Normalno, omjer PR / ER u stromi se kreće od 2 do 4. U srednjem stadijumu sekrecijske faze opaža se fiziološko smanjenje razine ERα u endometriju. Ovo je kritični događaj koji određene gene oslobađa od prevelikog utjecaja i daje signal za pojavu intrauterine receptivnosti..

Prekomjerna ekspresija ER α u srednjem stadijumu faze sekrecije uzrokuje kršenje ekspresije bioloških markera implantacije, narušava receptivnost endometrija.

Složeni studijski program sastoji se od slijedećeg panela antitijela: ER, PgR, CD56, CD138, LIF, kao i brojanja broja pinopodija.

Imunohistokemijska studija

Imunohistokemijska ispitivanja ili imunohistokemija (skraćeno IHC) je analiza koja se koristi za dijagnosticiranje različitih bolesti, a posebno se široko koristi u onkologiji. Pomoću njega otkrivaju se markeri - tvari (proteini), koje u velikim količinama proizvode tumorske stanice. Pomaže liječnicima da riješe različite dijagnostičke zadatke..

Suština IHC studije je da se uzorak tumorskog tkiva dodaju antitijela koja prepoznaju željenu tvar kao antigen i vežu se na nju. Zbog toga se odgovarajuća područja tumorskog tkiva oboje i mogu se otkriti kada se pregledaju pod mikroskopom..

Za što se koristi IHC analiza u onkologiji??

imunohistokemija pomaže u rješavanju sljedećih zadataka:

• Da biste razjasnili dijagnozu, vrstu i podvrste malignog tumora, ako citološki i histološki pregled to ne dopuštaju. Na primjer, postoji oko 70 vrsta limfoma i leukemije. Najčešće se dijagnosticiraju pomoću imunohistokemije. Ponekad su potrebna dodatna istraživanja.
• Otkrijte prirodu i lokalizaciju glavnog tumora ako se mogu otkriti samo udaljene metastaze, a njihovo podrijetlo nije jasno.
• Odaberite optimalni režim terapije. Pomoću imunohistokemijske analize moguće je procijeniti osjetljivost malignog tumora na određene lijekove, otkriti "molekularne mete" za antitumorska sredstva.
• Procijenite stupanj malignosti tumorskih stanica, prognozu.
• Diferencijalna dijagnoza: studija pomaže u razlikovanju malignih tumora od benignih neoplazmi, ne-tumorskih procesa.
• Dijagnosticirati više tumora. Imunohistokemija raka koristi se kada pacijent posumnja u istodobnu prisutnost dvije ili više različitih vrsta malignih tumora.

Kako se vrši analiza?

Da bi proveo istraživanje o različitim markerima tumora, liječnik mora obaviti biopsiju - nabaviti fragment malignog tumorskog tkiva i poslati ga u laboratorij. Tamo se materijal priprema na poseban način (koristeći parafinizaciju ili zamrzavanje), obrađuje se odgovarajućim antitijelima i ispituje pod mikroskopom. Imunohistokemija tumora omogućava ne samo identificiranje željene tvari, već i procjenu njene lokalizacije u tkivu, prosuđivanje količine.

Nakon završetka studije, liječnik prima zaključak iz laboratorija. Vrijeme analize utvrđuje se klauzulom 24. Naredbe Ministarstva zdravlja Rusije br. 179n od 24. ožujka 2016. Ako se tumorno tkivo ispita na 5 različitih markera ili manje, rezultat treba biti spreman u roku od tjedan dana, ako za veću količinu - u roku od 15 dana.

Koje se vrste raka najčešće koriste u imunohistokemijskim studijama??

Imunohistokemijsko ispitivanje biopsijskog materijala pomaže u prepoznavanju različitih vrsta tumorskih biljega. Evo nekoliko:

• Za karcinom dojke: hormonski receptori (estrogen, progesteron), HER2.
• U karcinoidima (neuroendokrini tumori): receptori za hormon somatostatin tipa 2A i 5.
• Za ne-stanični karcinom pluća (NSCLC) i neke druge vrste raka:, ROS1, ALK.
• Za rak debelog crijeva i neke druge zloćudne tumore: mikrosatelitska nestabilnost.

Ostavite svoj telefonski broj

Imunohistokemijska ispitivanja karcinoma dojke

U karcinomu dojke najvažnija su tri proteina: receptor za estrogen, receptor za progesteron i HER2. Prisutnost ovih molekula na površini stanica raka čini ih osjetljivim na određene lijekove. Ako imunohistokemijom nije otkrivena nijedna od ovih molekula, dijagnosticira se trostruko negativni karcinom dojke. Ima agresivniji tok, teže ga je liječiti.

U laboratoriju se sadržaj tih tvari u tumorskim stanicama procjenjuje pomoću posebnih ljestvica:

• 0 - manje od 10% slabo obojenih stanica.
• 1+ - slabo djelomično obojenje više od 10% stanica.
• 2+ - slabo do umjereno bojenje više od 10% stanica.
• 3+ - snažno, potpuno bojenje više od 10% stanica.

Imunohistokemijske studije za rak pluća

U karcinomu pluća, koristeći imunohistokemiju, moguće je razjasniti histološki tip malignog tumora. Različiti stanični podtipovi kod malog staničnog karcinoma pluća mogu izraziti različite markere:

• Većina adenokarcinoma (maligni tumori iz stanica koje stvaraju sluz): citokeratin 7 (CK7), transkripcija štitnjače (), p63 protein protein, citokeratin 20 (CK20), p63 protein protein,.
• Skvamoznocelularni karcinom (iz skvamoznog epitela koji usmjerava dišne ​​putove): CK5 / 6, p63, 34bE12. i CK7 u karcinomu pločastih stanica pluća obično nisu.

Imunohistokemijska analiza raka pluća također će biti potrebna za otkrivanje proizvoda "pogrešnih" gena koji mogu biti meta ciljanih lijekova. Ovo pomaže da shvatite vrijedi li propisivati ​​ove lijekove pacijentu:

• EGFR je receptor za epidermalni faktor rasta koji se nalazi na površini tumorskih stanica i uzrokuje njihovo nekontrolirano razmnožavanje. U ovom slučaju mogu biti učinkoviti ciljani lijekovi: erlotinib (Tarceva), afatinib (Gilotrif), gefitinib (Iressa), osimertinib (Tagrisso), dakomitinib (Vizimpro), necitumumab (Portrazza).
• ALK - mutacija u ovom genu pojavljuje se kod ne-staničnog raka pluća u oko 5% slučajeva. Koriste se ciljani lijekovi: crizotinib (Xalkori), ceritinib (Zikadia), alektinib (Alekenza), brigatinib (Alunbrig), lorlatinib (Lorbrena).
• ROS1 je gen u kojem se mutacije javljaju kod ne-staničnog karcinoma pluća u 1-2% slučajeva. Istodobno, ciljani lijekovi poput krizotiniba (Xalkori), ceritiniba (Zykadia), lorlatiniba (Lorbrena), entrectiniba (Roslitrek) pomažu.
• - protein koji se veže na molekulu PD1 na površini, suzbija njihovu aktivnost i sprječava ih da napadaju tumorske stanice. Ako se ovaj marker nađe u tumorskom tkivu, može se propisati imunoterapija iz skupine inhibitora kontrolne točke..

Imunohistokemijski testovi

Imunohistokemijska studija

Imunohistokemijska studija (IHC) osnova je suvremene morfološke dijagnoze tumorskih bolesti koja određuje ispravnost dijagnoze, daljnju prognozu i, u nekim slučajevima, formiranje indikacija za imenovanje ciljane terapije.

Glavni cilj IHC studije je utvrđivanje diferencijacije i histogeneze (pripadnosti tkiva) tumora.

Imunohistokemijska studija (IHC) dodatna je dijagnostička metoda koja se koristi pored glavnog histološkog obojenja hematoksilinom i eozinom, koja omogućava otkrivanje i razlikovanje benignih i zloćudnih novotvorina. Često, konačna dijagnoza, uz specifičnu morfološku sliku, zahtijeva pojašnjenje imunofenotipa ili bioloških svojstava tumora, koja igraju važnu ulogu u prognozi bolesti i određivanju indikacija za propisivanje ciljanih lijekova. Do danas je moderna znanost uspjela dokazati da je određivanje bioloških svojstava tumora i otkrivanje genetskih determinanti (genetskih svojstava tumora) ključ za uspješno liječenje u onkologiji..

Nedavno je IHC analiza postala široko korištena u svakodnevnoj dijagnostičkoj praksi patologa i prestala je biti metoda čisto znanstvenog istraživanja..

Glavni cilj IHC studije je utvrđivanje diferencijacije i histogeneze (pripadnosti tkiva) tumora.

Što je histogeneza i diferencijacija tumora?

1. Histogeneza tumora je njegovo tkivno podrijetlo. Pojašnjenje ove činjenice od velike je dijagnostičke vrijednosti i omogućuje vam odabir razumnog tretmana. Doista, njegova osjetljivost na kemijsku ili radijacijsku terapiju ovisi o podrijetlu tumora..

2. Stupanj diferencijacije pokazuje koliko se tumorska stanica u strukturi i funkciji razlikuje od normalne.

Ovisno o stupnju diferencijacije, stanice tumorskog supstrata su:

• diferencirano, kad je struktura tumora što bliža strukturi tkiva prekursora;
• slabo diferencirana, čija se sličnost s izvornim tkivom briše;
• nediferencirana (anaplazija) - stanice koje su izgubile bilo kakvu sličnost s normalnom (izvorno).

Čemu služi?

1. Histološka dijagnoza tumora;
2. Određivanje nozološke varijante tumora;
3. Sposobnost određivanja primarnog tumora metastazama;
4. Određivanje prognoze tumorske bolesti;
5. Određivanje mogućnosti i indikacija za ciljanu terapiju, itd..

Mogućnosti imunohistokemijskih istraživanja u modernoj praktičnoj onkologiji su sljedeće:

Kada i kako se provodi IHC istraživanje?

Ovaj je test propisan ako postoji sumnja na tumorsku bolest. Materijal za istraživanje uzima se tijekom operacije ili biopsijom pomoću posebnih pinceta i igala. Iz tkiva se napravi tanak mikrorez, koji se zatim obrađuje otopinom specifičnih antitijela (imunohistokemijski pripravci), koji reagiraju s tumorskim proteinima (antigenima). Reakirana područja emitiraju sjaj različitog intenziteta na temelju kojeg liječnik izvodi zaključke. Na primjer, prisutnost ekspresije markerima tumora poput CD15 i CD30 omogućava dijagnozu Hodgkinovog limfoma; CD117 - stromalni tumori gastrointestinalnog sustava; CD20 - B-stanični limfomi; CD3 - T stanični limfomi; HMB45, MelanA - melanom itd..

antitijela

Za IHC analizu primarnih tumora i njihovih metastaza koristi se širok raspon markera - antitijela (marker koji je pokazatelj normalnih bioloških procesa, patogenih procesa ili farmakološkog odgovora na terapijsku intervenciju, koji se može objektivno izmjeriti i procijeniti). Antitijela su citospecifična, tkivna su specifična, mogu odražavati procese stanične proliferacije i tumore povezane s tumorima i, konačno, mogu biti pravilno markeri tumora, kao što su onkofetalni antigeni, enzimi, proteinski proizvodi staničnih onkogena itd..

Naš laboratorij ima sveobuhvatan skup antitijela odobrenih za upotrebu kao dijagnostičke testove za tumorske i ne-tumorske lezije različitih organa i sustava..

Količina korištenih protutijela ovisi o pojedinačnom slučaju i pretpostavljenoj dijagnozi. "Prošireni panel antitijela" je skup antigena za različite tumorske strukture. Tu je i "mali panel" koji prikazuje najčešće tumore. Izbor panela protutijela može se izvršiti na dva načina: u fazama, postupno povećavajući njihov spektar, ili možete odmah koristiti široku ploču reagensa. S jedne strane, značajne uštede u reagentima i fondovima s većim troškovima rada i dugim vremenom olova, s druge strane, velika potrošnja protutijela, od kojih neka pomažu u konačnom dijagnozi uspostaviti konačnu dijagnozu..

Stručnjaci našeg laboratorija pridržavaju se činjenice da bi IHC analiza kao dodatna metoda trebala uključivati ​​i pozitivne rezultate ekspresije markera koji karakteriziraju određeni imunofenotip tumora, i negativne, što omogućava isključenje drugih hipoteza i smanjenje volumena dijagnostičkih pogrešaka na minimum..

Odabrane bolesti i antitijela koja se koriste za njihovu dijagnozu

Tumori dojke

Rak dojke je najčešći rak kod žena i drugi najčešći uzrok smrti povezane s rakom. Rana dijagnoza, pravovremeno i pravilno liječenje mogu značajno povećati šanse za oporavak. Tradicionalne imunohistokemije (IHC) tehnike mogu raditi s vrlo malim uzorcima tkiva. Ova okolnost, u kombinaciji s primjenom antitijela specifičnih za antigene tumorskih stanica, čini ovu metodu učinkovitim alatom u rukama putomorfologa koji se bavi dijagnosticiranjem i prognoziranjem tijeka onkoloških bolesti..

Glavni dijagnostički markeri:

• Estrogeni receptor
• Progesteronski receptor
• HER-2 / neu
• Ki-67
• p120 Katenin
• CadherinE
• "Zlatni standard" za dijagnosticiranje tumora dojke - hormonalni profil PR, ER, HER-2 / neu, Ki-67 - dijagnoza je svih dostupnih receptora koji su odgovorni za aktivnost tkiva raka. Uključuje istraživanja na više pokazatelja.
• PR, ER su specifični receptorski proteini koji reagiraju na proizvodnju estrogena i progesterona. Većina karcinoma dojke (oko 80 posto) aktivno reagira na promjene u razini hormona. Utvrđivanje reaktivnosti ovih receptora igra kritičnu ulogu u procjeni potencijala hormonske terapije..
• HER-2 / neu je genska protein struktura koja se nalazi u karcinomu. To je receptor koji reagira na proizvodnju specifičnih antitijela. Preporučljivo je proučiti ovaj parametar s gledišta određivanja prognoze liječenja raka. S visokom HER-2 / neu aktivnošću, tumor je teško liječiti; prvo je potrebna monoklonska terapija za suzbijanje aktivnosti ove strukture.
• Ki-67 je struktura proteina s sposobnošću aktiviranja tijekom aktivnog rasta tumora. Proučavanje ovog pokazatelja omogućava procjenu prognoze za život pacijenta. Što su veće ekspresivne karakteristike Ki-67, to je manje diferencijacije tumora, manje su šanse da bolesna žena ima za oporavak.

Tumori prostate

Rak prostate jedan je od najčešćih karcinoma u svijetu. Većina slučajeva (50 - 70%) dijagnosticira se u 3-4 faze, uključujući 25% - generalizacijom tumorskog procesa. Nažalost, rana dijagnoza raka je teška zbog česte odsutnosti karakterističnih simptoma. Uz kliničke metode, najinformativnija je metoda histološkog pregleda biopsije prostate.

Glavni dijagnostički markeri:

• p63;
• PSAP (ProstaticAcidPhosphatase);
• PSA (prostatski specifični antigen);
• P504 (= AMACR - alfa metilacil-CoA-racemaza);
• Citokeratin visoke molekulske težine (34betaE12);
• ERG (GTS povezan gen);
• PSMA (prostatski specifični membranski antigen);
• Androgeni receptor;
• Bcl-X;
• Citokeratin 5 i 6;
• Cytokeratin Pan;
• Keratin 8;
• Citokeratin 8 i 18;
• Ki-67;
• p53;
• sinaptofisin;
• Koktel bazalnih stanica - Citokeratin HMW + p63.

Tumori pluća

Rak pluća jedan je od najčešćih uzroka smrti. Od ove bolesti u svijetu svake godine umre oko milijun ljudi. U muškaraca je karcinom pluća u 85-90% slučajeva povezan s pušenjem duhana. Prognoza za rak pluća i dalje je loša. U nedostatku liječenja, do 90% pacijenata umre u roku od 2 godine od trenutka dijagnoze. Uz kirurško liječenje, stopa preživljavanja od 5 godina iznosi oko 30%. Kirurško liječenje u kombinaciji s terapijom zračenjem i lijekovima povećava 5-godišnje preživljavanje za 40%. Prisutnost metastaza značajno pogoršava prognozu. Suvremena dijagnostika i liječenje bolesnika s karcinomom pluća ne mogu bez morfološke provjere tumora uz pojašnjenje histološke strukture i stupnja anaplazije (diferencijacije) tumorskih stanica. Imunohistokemijska metoda ostaje jedna od najinformativnijih metoda u ovoj fazi dijagnoze.

Glavni dijagnostički markeri:

• Faktor transkripcije štitnjače-1;
• Citokeratin 7;
• NEMALA CIJEVNA LIJEKA RANA
  • ALK (DE5F3);
• RAK NA LJUBAVNOM LIJEKU
  • Citokeratin 14;
  • Citokeratin 5/6;
  • HUP;
  • EGF-R;
• MALA CELJNA KARCINOMA DUGA
  • ChromograninA;
  • sinaptofisin;
• LIJEK ADENOKARCINOMA
  • EMA;
  • CytokeratinPan.

Melanoma

Melanom (latinski melanom, melanom malignum od starogrčkog μέλας - „crni“) (usta. Melanoblastoma) je maligni tumor koji se razvija iz melanocita - pigmentnih stanica koje proizvode melanine. Jedna od tri vrste raka kože, i najopasnija od njih. Uglavnom se lokalizira u koži, rjeđe u mrežnici, sluznici (usna šupljina, vagina, rektum). Jedan od najopasnijih zloćudnih tumora za čovjeka, često ponavljajući i metastatski limfogeni i hematogeni u gotovo svim organima. Provjera kožnog melanoma i njegovih metastaza ostaje jedan od najtežih zadataka onkomorfologa. Među ne-pigmentiranim melanomima postoje nodularni, površinski rašireni, poput lentigo-a, bistro-stanični, vretenasti, pleomorfni, malocelični, miksoidni, „nevoidni“, krikoidni i drugi oblici.

Glavni dijagnostički markeri:

• MelanomAsociraniAntigen (MAA);
• CD63;
• Melanomski marker (HMB45);
• MART-1 / Melan-A;
• Melanom (gp100);
• tirozinaze;
• Mikroftalmijski transkripcijski faktor (MiTF);
• Receptor živčanog faktora rasta (NGFR);
• S100;
• Pan za melanom (HMB45 + A103 + T311);
• MART-1 + tirozinaza;
• vimentin.

Standardni panel sadrži oko pet imunohistokemijskih markera:

• p53 - stupanj aktivnosti mitoze melanoma;
• Ki-67 - procjena intenziteta proliferacije, određuje prognozu bolesti;
• bcl-2 - protein koji sprečava prirodnu apoptozu kožnog melanoma, procjenjuje se vjerojatnost metastaza;
• HMB-45 - procjena funkcije melanocita;
• S-100 je tipični antigen koji se nalazi samo u melanomu i može se razlikovati od ostalih tumora ili benignih izraslina.

Limfoproliferativni poremećaji

Limfom je zloćudna tumorska bolest limfnog sustava. Među limfomima razlikuju se limfogranulomatoza (Hodgkinov limfom), a sve ostale vrste limfoma su ne-Hodgkinovi limfomi (NHL). Prema vrsti limfoidnih stanica iz kojih tumor nastaje, izolirani su B-, T- i (rijetko) NK-stanični limfomi. Većina limfoma čini B stanicu. Dijagnoza limfoproliferativnih bolesti trenutno je na prvom mjestu moderne patologije i zahtijeva jedan od najopsežnijih ploča s markerima. Ukupna učestalost svih vrsta ne-Hodgkinovih limfoma u europskim zemljama iznosi 12-15 slučajeva na 100 tisuća stanovnika godišnje. Rizik od njihove pojave povećava se s godinama. Infekcija virusom Epstein-Barra povezana je s povećanim rizikom od razvoja različitih vrsta limfoma, uključujući Burkittov limfom. U djece su ne-Hodgkinovi limfomi relativno rijetki: ne više od 5% svih slučajeva NHL-a pripisuju se djetinjstvu i adolescenciji. Međutim, limfomi i dalje zauzimaju treće mjesto u strukturi dječjih malignih bolesti po učestalosti - nakon leukemije i tumora središnjeg živčanog sustava..

Glavni dijagnostički markeri:

Stromalni tumori gastrointestinalnog trakta (SOGT)

Gastrointestinalni trakt javlja se uglavnom u želucu (60%) i tankom crijevu (25%), ali se javlja i u rektumu (5%), jednjaku (5%) i brojnim drugim mjestima (5%), uključujući dodatak, žučni mjehur, mezenterija i omentum. Starost pogođenih bolesnika kreće se od adolescencije do 90 godina, ali većina je starijih osoba s vrhuncem od oko 60 godina. U većini studija postoji mala predispozicija za muškarce. 1998. godine pokazano je da TGCT eksprimira receptor za tirozin kinazu KIT (CD117). Intersticijske stanice Cajala (ICC) bile su uzrok ovih tumora. Kao i GST, Cajal stanice izražavaju KIT i većina ih je pozitivna na CD34. Naknadne studije s velikim brojem različitih laboratorija potvrdile su da je KIT najspecifičniji marker SOS-a. U otprilike 90% slučajeva prisutan KIT prisutan je na staničnoj površini i / ili u citoplazmi tumorskih stanica u gastrointestinalnom traktu. U velikoj većini tumora, KIT ekspresija je snažna i homogena, ali u nekim se slučajevima pokazuje samo žarišna pozitivna reaktivnost, a KIT je odsutan u maloj podskupini (

5%) tumora, koji prema drugim morfološkim i imunofenotipskim karakteristikama odgovaraju gastrointestinalnom traktu. Među KIT-pozitivnim SALFA-om, ekspresija CD34 određena je u 60-70% slučajeva, dok je 30-40% pozitivno na aktin glatkih mišića (SMA), a 5% na protein S-100. Nijedan od ovih antigena nije specifičan za gastrointestinalni trakt. Ekspresija desmina u stvarnom KIT-pozitivnom SAT-u je izuzetno rijetka (1-2% slučajeva) i obično je žarišna. Ovaj je oblik onkoloških bolesti teško morfološki dijagnosticirati. Korištenjem modernih ploča s markerima moguće je jasno i razumno dijagnosticirati različite oblike opisane patologije. Imunohistokemija je obavezna.

Glavni dijagnostički markeri:

Rak debelog crijeva

Kolorektalni karcinom je treći najčešće dijagnosticirani rak u Sjedinjenim Državama (bez raka kože) u muškoj i ženskoj populaciji. Stopa incidencije kolorektalnog karcinoma opadala je u posljednja dva desetljeća (od 66,3 slučaja na 100 000 u 1985. na 45,5 slučajeva u 2006.). To se pripisuje povećanoj upotrebi testova za kolorektalni probir koji omogućuju otkrivanje i uklanjanje gastrointestinalnih polipa prije nego što postanu rak. Za razliku od ukupnog pada, među mlađom odraslom populacijom mlađom od 50 godina, za koju se ne preporučuje probir zbog umjerenog rizika, učestalost karcinoma debelog crijeva i rektuma povećava se od 1994. za oko 2% godišnje kod muškaraca i žena. U 2016. stopa smrtnosti od kolorektalnog karcinoma u SAD iznosila je 49.500. Smrtnost od kolorektalnog karcinoma opadala je u obje skupine muškaraca i žena u posljednjih nekoliko desetljeća, a strmiji pad u posljednje vrijeme. Taj pad odražava pad stope obolijevanja i poboljšanje rane dijagnoze i liječenja. Rane faze karcinoma debelog crijeva i rektuma obično su asimptomatske, pa je probir često potreban za otkrivanje bolesti u ovoj ranoj fazi. Napredovanje bolesti može uzrokovati krvarenje iz rektuma, pojavu krvi u stolici, promjenu pokreta crijeva, grčeve u donjem dijelu trbuha. Upotreba IHC-a kod raka debelog crijeva razmatra se na nekoliko razina: za karakterizaciju tumora (endokrini ili epitelijski tip), nasljednu predispoziciju i u svrhu prognoze. Pretežna upotreba IHC-a je identificiranje mogućih ili sumnjivih metastaza u kojima je debelo crijevo mogući osnovni. Tipična mjesta metastaza u debelom crijevu su jetra i pluća, oba organa koja mogu proizvesti morfologiju raka identičnu metastazi u debelom crijevu. IHC (klasa I FDA regulacije) koristi se nakon početne dijagnoze tumora histopatološkim pregledom i nije uključen za kliničare kao neovisno istraživanje.

Glavni dijagnostički markeri:

Metastatski karcinom

Najčešća upotreba imunohistokemije u istraživanju tumora jetre je određivanje izvora metastaza kada primarna lokalizacija tumora nije poznata. Razvoj i primjena imunološkog panela može pomoći u rješavanju gotovo svih dijagnostičkih problema. 2-6 Citokeratini (CK) 7 i CK 20 - prvi korak u identifikaciji mnogih tumora i dodatnim imunološkim odgovorima relativno specifičnim za tumore ženskog i muškog genitalnog trakta, često omogućuju prepoznavanje primarne lokalizacije metastatskog tumora.

Glavni dijagnostički markeri:

• Citokeratini različitih molekularnih težina (CK 18, CK 19, CK 7 i CK 20, itd.).

Također se preporučuje uključivanje IHC testova usmjerenih na ekspresiju HER2 / neu i Ki-67 u dijagnostičkoj ploči..

• HER2 / neu je membranski protein koji je kodiran ERBB2 genom. Povećanje njegove ekspresije važno je u patogenezi i napredovanju određenih malignih procesa. Ispitivanje ovog receptora važan je biološki pokazatelj raka želuca, dojke, maternice i njegovih dodataka.;
• Ki-67 je nuklearni antigen koji se sastoji od dva polipeptidna lanca i glavni je dio nuklearne matrice. Njegova ekspresija omogućava izoliranje proliferacijskih tumorskih stanica koje su u aktivnoj fazi životnog ciklusa stanice. Ovaj marker omogućuje određivanje fenotipa i brzine rasta tumora, rizik od metastaza, potencijalni odgovor na liječenje i ishod patološkog procesa..

Tumori želuca.

Imunohistokemijska ispitivanja (IHC) općenito nisu potrebna za procjenu benignih i malignih tumora želučanog epitela, jer histopatologija obično daje dijagnozu, ali IHC je potreban u istraživanju metastatskog karcinoma želuca kada izvor tumora nije jasan, ili kada makroskopski / Rendgenske manifestacije tumora su zbunjujuće (na primjer, rak želuca izravno i široko napada invaziju jetre i histološki se ne razlikuje od kolangiokarcinoma). Pored toga, IHC može biti koristan za identifikaciju nekoliko varijanti karcinoma želuca, uključujući hepatoidni adenokarcinom kod kojih se jetrena diferencijacija može potvrditi pozitivnim AFP odgovorom. Gastrični adenokarcinomi reagirat će s mnogim anti-keratinskim protutijelima, uključujući CK 18, CK 19, CK 7 i CK 20. Kada se CK 7 i CK 20 upotrebljavaju zajedno, mnogi želučani adenokarcinomi će obojati i CK 7 i CK 20. Otprilike 25% slučajeva će imati fenotip CK 7 + / CK 20- ili CK 7- / CK 20+), a mali broj slučajeva bit će negativan za oba markera. U početku se mislilo da će CDX-2, specifični marker raka debelog crijeva, biti reaktivan u više od 50% slučajeva i može ukazivati ​​na manje invazivnosti. Adenokarcinom želuca, karcinom crijeva i karcinom signifikantnih stanica, može imati neuroendokrino diferencijaciju i što možda nije očito iz histološke slike, ali se očituje obojenjem kromograninom i / ili sinaptofizinom

Određivanje ekspresije EGFR receptora u epitelnim tumorima

Određivanje imunohistokemijske (IHC) ekspresije receptora EGFR kod kolorektalnog karcinoma i tumora pluća, kao i kod tumora vrata i glave, provodi se za adekvatan izbor režima liječenja kemoterapijom.

EGFR (receptor epidermalnog faktora rasta) jedan je od transmembranskih receptora, izražava se na površini epitelnih stanica i sudjeluje u regulaciji rasta i diferencijacije stanica. Podjela stanica u njenoj prisutnosti događa se mnogo brže. Kada se EGFR receptor aktivira nakon vezanja na faktore rasta (EGF i TGF-a), aktiviraju se mehanizmi koji dovode do rasta tumora i povećava se proliferacija stanica karcinoma, a potiče se i proces metastaziranja. Ekspresija EGFR je pokazatelj da se stimulira rast tumora aktivnost receptora za epidermalni faktor rasta. Kako se aktiviranje receptora događa zbog samih tvari neoplazme, bilo bi ispravnije govoriti o ekspresiji EGFR-a tumorom. Ekspresija EGFR-a nalazi se u slijedećim oblicima raka: pluća, vrata i glave, debelog crijeva i rektuma. Imunohistokemijsko određivanje ekspresije EGFR-a omogućava uspostavljanje statusa tih receptora i propisivanje liječenja. Ekspresija EGFR-a izravno je povezana sa stupnjem zloćudnosti i stadijom razvoja tumora. Specijalist, prema dobivenim podacima imunohistokemijske studije, klasificira tumor kao EGFR-negativan ili EGFR-pozitivan.

Prekomjerna ekspresija EGFR-a ukazuje na visoku malignost, kasni razvoj tumora i metastatske procese. Ovaj faktor je nepovoljan u odnosu na prognozu bolesti i ukazuje na visoku proliferativnu aktivnost tumora, agresivnost, otpornost na terapiju..

Nizak stupanj ekspresije EGFR-a ukazuje na regresiju tumora s pozitivnom dinamikom u liječenju.

Imunohistokemijsko istraživanje osjetljivosti receptora na estrogen i progesteron u endometriju

Provodi se imunohistokemijsko istraživanje osjetljivosti receptora na estrogen i progesteron u endometriju kako bi se utvrdili uzroci nedostatka plodnosti, kao i radi procjene zloćudnosti procesa u tkivima maternice. Studija je složena, provodi se planirano, potrebna je odgovarajuća kvalifikacija patologa.

Receptori za estrogen (ER) i progesteron (PR) osjetljivi su markeri koji reagiraju na fluktuacije nekih hormona koji utječu na rast tumora i razvoj hiperplastičnih procesa u endometriju. Smješteni su kako u tkivima epitela maternice, tako i u stanicama mliječne žlijezde. Njihovo određivanje omogućava procjenu utjecaja hormonalnih čimbenika na progresiju malignog rasta, a osim toga identificiranje prisutnosti drugih žarišta aktivnosti, osim maternice. Uključeni su u program obveznog probira za bolesne žene s sumnjom na infiltrativno djelovanje karcinoma.

Imunohistokemijska studija se provodi sa:

• neplodnost;
• endometrijski tumori;
• disfunkcija menstruacije;
• hiperplastični procesi u endometriju.

U slučaju neplodnosti, tehnika će vam omogućiti da otkrijete može li se oplođena jajašca pričvrstiti na zid maternice. Za rak, metoda nije rana dijagnoza. Procjena aktivnosti receptora omogućava prepoznavanje prisutnosti metastaza i procjenu učinkovitosti liječenja u šupljini maternice. U slučaju poremećaja ovulacije, tehnika otkriva učinkovitost hormonske terapije. S promjenama u materničnoj šupljini hiperplastične prirode, povećanje aktivnosti receptora za estrogen i progesteron ukazuje na razvoj slabo diferenciranih tumora, potencijalno opasnih za ženin život.

Općenito načelo rezultata je da što je veća ekspresija receptorske aktivnosti, veća je vjerojatnost napredovanja tumora. Što je niža aktivnost, to je manja mogućnost prirodne gnojidbe.

Kronični endometritis

Kronični endometritis je upala sluznice sloja maternice, koju izazivaju razni virusi ili patogeni mikroorganizmi. U patološkom fokusu dolazi do morfoloških i funkcionalnih promjena endometrija.Hronični endometritis je klinički i morfološki sindrom u kojem se, kao posljedica oštećenja endometrija infektivnim agensom, događaju višestruke sekundarne morfofunkcijske promjene, što narušava cikličku biotransformaciju sluznice maternice, što dovodi do trajnog poremećaja menstrualne i generativne funkcije. učestalost kroničnog endometritisa u populaciji je 2,6-51%. Štoviše, 60,4% tih žena su neplodne, a neuspješni pokušaji IVF-a i prijenos embrija zabilježeni su u 37%. 2006. godine Međunarodna federacija ginekologije i akušerstva izjednačila je koncepte "nerazvijene trudnoće" i "kroničnog endometritisa".

Uzroci kroničnog endometritisa:

• infekcije zdjeličnih organa, vagine i cervikalnog kanala;
• intrauterini uređaj;
• rani intimni kontakti;
• radioterapija zdjeličnih organa;
• kirurška intervencija u šupljini maternice;
• zlouporaba alkohola i pušenje.

Stručnjaci koji se bave praksom odnose upalne procese koji se događaju u zdjeličnim organima kao autoimunu patologiju. Da bi se utvrdila priroda poremećaja i identificirali pacijenti s patološkim odgovorom imunološkog sustava koji izaziva upalu endometrija, propisano je imunohistokemijsko istraživanje koje se provodi pomoću standardne ploče monoklonskih protutijela: CD16, CD20, CD138, CD56, HLA-DR.

Imunohistokemijska studija osjetljivosti endometrija (implantacijski prozor)

Receptivnost endometrija je kompleks strukturnih i funkcionalnih karakteristika endometrija, što određuje njegovu sposobnost implantacije. Od početka 90-ih godina prošlog stoljeća, pojam "prijemčivosti endometrija" počinje dobivati ​​svoje suvremeno značenje kao proces složene integracije i višerazinskog "dijaloga" između endometrija i zametaka u određenom razdoblju "implantacijskog prozora". Trajanje "implantacijskog prozora" u ljudi je u prosjeku 4 dana: od 6. do 8. do 10. dana nakon vrhunca izlučivanja LH, odnosno 20-24 dana menstrualnog ciklusa (s menstrualnim ciklusom od 28 dana). Trenutno postoje tri stupnja receptivnosti: genetska, proteomska i histološka. Kada se otvori „implantacijski prozor“, ekspresija 395 gena (ApoE, PLA2) se povećava u endometriju i ekspresija 186 gena (ITF, različite proteaze, proteini izvanstanične matrice itd.) Smanjuje se. Među proteomskim markerima povezanima s prijemčivima endometrija razlikuju se različite molekule adhezije, faktori rasta, citokini i receptori: IL-1 porodica, LIF i LIF-R, αVβ3, TNF-α, IFN-γ, itd. Od njih je leukemija najviše proučavana -inhibicijski faktor (LIF) član je IL-6 obitelji. Njegova najveća ekspresija u endometriju opažena je 20. dana ciklusa, treća razina receptivnosti je histološka. "Prozor implantacije" u endometriju odgovara srednjem stadijumu sekrecijske faze menstrualnog ciklusa. Endometrij može imati receptivna svojstva samo ako se molekularni biljezi receptivnosti otkriju točno u srednjem stadijumu faze izlučivanja menstrualnog ciklusa. Jedna od ključnih ultrastrukturnih formacija koja sudjeluje u stvaranju receptivnosti jesu. pinopodia. To su mikroskopske izbočine u apikalnom dijelu površinskog epitela endometrija, formirane na mjestu mikrovillija u "prozoru za implantaciju" i izbočene u šupljinu maternice. Pretpostavlja se da su glavni receptori za vezanje blastocita smješteni na površini pinopodija, gdje je koncentriran i LIF. Svaka neravnoteža u ekspresiji steroidnih receptora može dovesti do poremećaja morfofunkcijskih svojstava endometrija, njegove receptivnosti. Stoga određivanje razine ER i PR u srednjem stadijumu faze sekrecije omogućuje dopunu morfološkog pregleda endometrija, radi procjene njegove receptivnosti. Normalno, omjer PR / ER u stromi se kreće od 2 do 4. U srednjem stadijumu sekrecijske faze opaža se fiziološko smanjenje razine ERα u endometriju. Ovo je kritični događaj koji određene gene oslobađa od prevelikog utjecaja i daje signal za pojavu intrauterine receptivnosti..

Prekomjerna ekspresija ER α u srednjem stadijumu faze sekrecije uzrokuje kršenje ekspresije bioloških markera implantacije, narušava receptivnost endometrija.

Složeni studijski program sastoji se od slijedećeg panela antitijela: ER, PgR, CD56, CD138, LIF, kao i brojanja broja pinopodija.

Cijena za testove

Endoskopski materijal

* (broj radnih dana, isključujući dan isporuke materijala)

Kako napraviti istraživanje?

Materijal za istraživanje: hirurški i biopsijski materijal, kao i gotovi parafinski blokovi s naočalama (uzorak tumora). Preporučljivo je dati izvadak iz anamneze, rezultata CT, MRI i prethodnog histološkog izvještaja (ako dijagnoza tumora nije primarna).

Primanje materijala: u radno vrijeme medicinskog centra.

Priprema za istraživanje: nije potrebna.